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牛偽狂犬病抗原(PRV Ag)ELISA實驗原理
點擊次數(shù):1074 更新時間:2011-10-18

牛偽狂犬病抗原(PRV Ag)ELISA實驗原理

本試劑僅供研究使用       目的:本試劑盒用于測定牛血清,血漿及相關液體樣本中偽狂犬病抗原(PRV Ag)水平。

實驗原理:

  本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定標本中偽狂犬病抗原PRV Ag。用純化的偽狂犬病抗原(PRV Ag)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中偽狂犬病抗原(PRV Ag)相結(jié)合經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標記的偽狂犬病抗原(PRV Ag)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中牛偽狂犬病抗原(PRV Ag)的存在與否。

 

試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1

1

 

封板膜

2片(48

2片(96

 

密封袋

1

1

 

酶標包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

陰性對照

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃保存

陽性對照

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃保存

酶標試劑

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

顯色劑A

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

顯色劑B

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

終止液

3ml×1

6ml×1

2-8℃保存

濃縮洗滌液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8℃保存

 

結(jié)果判定:

  試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10

  臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15

  陰性判定:樣品OD< 臨界值(CUT OFF)者為偽狂犬病抗原(PRV Ag)陰性

  陽性判定:樣品OD臨界值(CUT OFF)者為偽狂犬病抗原(PRV Ag)陽性

注意事項

1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。

2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

3.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。

4.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

5.底物請避光保存。

6.試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準,使用雙波長檢測時,參考波長為630nm

7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時必須注意安全。

 

保存條件及有效期

1.試劑盒保存:2-8。

2.有效期:6個月

 

滬公網(wǎng)安備 31011802001678號

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